猪人工授精技术和生猪遗传改良(2)

　　3.4  精子介导的转基因技术

　　精子介导的转基因技术(Sperm-mediated gene transfer，SMGT)，即精子载体法，是将精子适当处理，使其携带外源目的DNA片段，通过受精把外源目的片段导入动物胚胎，从而使外源基因进入子代的基因组中。由于精子载体法简便、实用，人们只需利用人工授精程序就可以得到大量可供商业利用的转基因动物，因此精子载体法在生产转基因动物方面显示出优越性和良好的前景。

　　1971年Brackett等将兔的精子与用H3-胸苷标记的SV40-DNA共处理培养后，在精子头部检测到了放射性物质，用该方法处理过的精子进行人工授精，受精卵和2-细胞时的胚胎都检测到由病毒SV40引起的病变，证实外源基因可以进入精子细胞，并能在受精后表达[15]。1989年Lavitrano等利用小鼠附睾内精子与含CTA基因的线性体质粒pSV2cat共孵育后体外授精，移植2-细胞时的胚胎到宿主小鼠子宫，获得的后代鼠30%为转基因鼠，称之为精子介导的转基因法(SMGT)[16]。Sato等通过直接注射外源DNA到小鼠睾丸内完成转基因，发展了一种新的转基因途径，即睾丸介导的转基因法(TMGT)[17]。以后关于利用精子载体法进行转基因研究的成功多有报道，并有多种动物获得了转基因后代，到2000年，根据Gandolfi的统计，已经有20多种动物(包括鱼类，鸟类，哺乳动物及人)的精子被证明具备吸附整合外源基因的能力[18]。本课题组已采用精子介导方法，获得数头携带GFP基因的转基因猪。
猪的人工授精体系在欧美国家已经比较完善，在美国，超过60%的母猪是人工授精配种的，在欧洲的一些国家，这个比例可高达90%。世界上畜牧业发达国家在种猪生产管理方面已为我们提供了许多可以借鉴的经验。社会化的公猪站（人工授精站）是人工授精体系的核心，必须完善区域性种公猪站建设，依托国家生猪良种补贴项目，加快普及猪人工授精技术，将优良种猪精液迅速推广应用到生产中，实现社会化的遗传改良，推动国家联合育种的实施和实践。

作者：朱健彬1，张守全2
（1.惠州市源茵畜牧科技有限公司；2.华南农业大学动物科学院）《广东养猪业》2011年第2期