蓝耳病、圆环病毒病防控新技术研究进展

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　　猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸道综合症病毒引起的一种严重危害养猪业的新型传染病。该病1987年在美国首先发生，随后在世界各主要养猪国家流行。我国1996年由郭宝清等首次报道该病，研究证明其为美洲型。本病的主要临床症状为发病母猪出现发热、厌食、流产、死胎及木乃伊；种公猪出现性欲下降，精液品质和精子活力下降，仔猪和育肥猪表现为呼吸系统疾病，呼吸困难、急促、呈间质性肺炎、耳部和肢体发绀。本病极易引起继发感染，从而加剧病情，使死亡率升高。

　　猪圆环病毒是德国学者Tischer1974年在PK-15细胞系的传代过程中发现的，当时认为是一种细胞污染物。PCV分为PCV-1和PCV-2，PCV-1无致病性，而PCV-2具有致病性。最近的研究表明，除断奶后仔猪多系统衰竭症（PMWS）、猪皮炎肾病综合症(PDNS)外，PCV-2还与增生性坏死性肺炎（PNP）、猪呼吸道综合症（PRDC）、猪繁殖障碍、仔猪先天性震颤（CT）以及无名高热病等疾病有关。

　　目前的研究表明，在全国范围内暴发的“高热综合症”中，PRRSV和PCV-2是两个最主要的病原体，它已经成为制约我国养猪业发展的最重要的疾病。

　　１，蓝耳病国内外研究现状及防控方法

　　目前国内外对于蓝耳病的分子病理学与免疫学研究都取得了一定的进展，这为以后蓝耳病的防控提供了很好的基础。当前国内对于蓝耳病的防控主要还是依靠疫苗，而且也取得了很好的效果。目前市面上主要有两种蓝耳病疫苗，一种是弱毒苗。对于用蓝耳病弱毒苗免疫的母猪，当疫苗的基因序列与某一群体存在的PRRS病毒基因序列相似性达到70%～80%时，疫苗免疫效果好。反之，如果所使用的弱毒疫苗的基因序列与本场存在的PRRS病毒基因序列不同时，则意味着可能会有一场新的蓝耳病的到来，存在排毒、散毒的危险。另一种是灭活苗，毫无疑问，灭活苗在使用上是比较安全的，不存在排毒、散毒的风险，可以诱导一定的抗体产生，但是其免疫保护的稳定性还存在争议。因此，养猪界到目前为止对于蓝耳病疫苗到底应不应该注射，在疫苗的选择上是应用弱毒苗还是灭活苗好，都没有一个定论。　　

　　国外目前对于蓝耳病的防控则主要采取净化。最经典的方法就是清群、建群，也就是猪场一旦暴发蓝耳病后，立即将所有的猪清群，并对猪场进行彻底的清洗、干燥、消毒，一般30天后，猪场存在的蓝耳病病毒将彻底被杀灭，再从新引进阴性猪进行组群。这种清群，建群的方法其实对于其它的疾病也适应。但是该方法的缺点就是代价太大，成本很高，一般在我们国内很难实施。另一种是逐步替换法，当猪场确认正在发生蓝耳病，母猪群出现流产，而且十分集中的时候，采集流产母猪的血清，并引进200天内需要的后备母猪，将整个所有猪群（公母猪，后备猪）用血清进行人工感染、接种，最后封群200天（猪感染蓝耳病病毒后排毒期最多200天），期间执行严格的生物安全制度，特别是对死胎，木乃伊要严格进行处理，及时淘汰携带病毒的弱仔，200天以后，再逐步的引进阴性猪，并对引进的阴性猪进行检测，至少2-3次，如果一直是阴性，说明封群成功，蓝耳病得到了净化。这种方法在国外应用的已经相当成功，很多国外猪场都是通过这种方法净化了蓝耳病，目前我们国家也有一小部分规模猪场试图通过这种方法净化蓝耳病，能否成功我们也将拭目以待。

　　2、将该基因片段插入到PBAsi-mu6 DNA质粒载体中，以获得高效表达的dsRNA。

　　3、导入的dsRNA进入机体以后，在ATP的参与下，被RNaseIII家族中的Dicer核酸酶降解成21~23nt的siRNA，每个siRNA分子3ˊ末端带2个悬挂的核苷酸，此结构是siRNA进入蛋白复合体所必须的。

　　4、siRNA与一序列特异性蛋白结合形成无活性的RNA诱导沉默复合体（RNA induced silencing complex,RISC），在ATP存在时RISC被激活，被激活的RISC通过碱基配对导向同源的转录产物mRNA，把mRNA裂解成21ntRNA片段，从而诱导产生特异性的基因沉默，而且这种沉默是持续性的，即当siRNA反义链识别结合靶mRNA后，siRNA反义链可作为引物，以靶mRNA为模板在RdRP酶的催化下合成新的dsRNA，然后由Dicer切割产生新的siRNA，新siRNA再去识别mRNA，又产生新的siRNA，经过若干次合成切割循环，沉默信号就会被不断的放大，从而有效抑制蓝耳病毒和圆环病毒的复制。

　　有理由相信，随着研究人员对基因沉默技术研究的不断深入，在不远的将来该技术一定会给养猪业带来福音。