猪O型口蹄疫不同疫苗免疫 抗体消长规律研究

猪O 型口蹄疫是由O 型口蹄疫病毒引起的猪的一种急性、热性、高度接触性传染病，该病传播迅速，发病率高，是世界动物卫生组织（OIE）规定必须报告的传染病之一，我国将其列为一类动物疫病。长期以来，使用猪O 型口蹄疫疫苗免疫接种是我国预防本病的重要措施。为科学制定猪O 型口蹄疫的免疫程序，合理使用猪口蹄疫O 型灭活疫苗和合成肽疫苗，于2014 年在我市绥阳县某种猪场，随机筛选90 头53 ～ 73 日龄仔猪分组进行猪口蹄疫O型灭活疫苗和合成肽疫苗及猪口蹄疫O型灭活疫苗不同剂量免疫后副反应调查、免疫抗体水平和抗体维持时间等相关工作的研究。

1 材料与方法

1.1 试验动物

随机选择53 ～ 73 日龄的仔猪若干头，无菌前腔静脉采血分离血清，用酶联免疫吸附试验检测口蹄疫母源抗体，筛选母源抗体阴性的仔猪90 头为试验动物。将90 头仔猪随机分成A、B、C 3 组，每组30 头，对每头仔猪进行编号。

1.2 试验疫苗

上海某生物医药有限公司生产的猪口蹄疫O 型合成肽疫苗（ 多肽2570+7309）；兰州某生物科技股份有限公司生产的猪口蹄疫O 型灭活疫苗（O/MYA98/BY2010 株）。

1.3 检测试剂

A 组和B 组用猪口蹄疫病毒O 型抗体检测试剂盒（酶联免疫法），郑州中道生物技术有限公司生产。C 组用O型口蹄疫病毒ELISA 抗体检测试剂盒，武汉科前生物制品有限责任公司生产。

1.4 免疫剂量

A 组每头仔猪耳根后肌肉注射猪口蹄疫O 型灭活疫苗2 mL ；B 组每头仔猪耳根后肌肉注射猪口蹄疫O 型灭活疫苗4 mL ；C 组每头仔猪耳根后肌肉深层注射猪口蹄疫O 型合成肽疫苗1 mL。

1.5 免疫副反应调查

免疫后72 h 内细心观察试验仔猪是否出现采食减少、体温升高甚至死亡等免疫副反应。

1.6 采血时间

分别于免疫后第7 d、15 d、30 d、45 d、60 d、90 d、120 d、150 d 和180 d，进行无菌前腔静脉采血并分离血清，4 ℃保存，次日检测。

1.7 抗体检测

酶联免疫吸附试验。按检测试剂盒使用说明书操作、判定。A 组和B 组：样品OD450nm 值≥ Cut Off 值时判为阳性；样品OD450nm 值＜ Cut Off 值时判为阴性；C 组：样品OD630nm 值≥ 0.4时判为阳性；样品OD630nm 值＜ 0.4 时判为阴性。

2 结果与分析

1) 免疫副反应调查结果见表1 和图1，本试验共有28 头猪出现了不同程度的免疫副反应，表现为精神沉郁、体温升高、呕吐和腹泻，其中A 组6 头，B组22 头，C 组未见免疫副反应，28 头猪均在72 h 内自愈。

2) 各组免疫后不同时间抗体的检测结果见表2、图2 和图3。整个试验过程因其他原因导致6 头猪死亡， 其中A 组2 头，即 45 d 和150 d 各死亡1 头；B 组于45 d 死亡1 头；C 组3 头，即15 d 死亡1 头、45 d 死亡2 头。从表2、图2 和图3 可知， A 组7 d 时免疫抗体阳性率即群体保护率为20.00%，15 ～ 150 d 群体保护率均﹥ 70% ； B组和C 组免疫第7 天时群体保护率分别为76.67%、73.33%，150 d 时3 组的群体保护率分别为71.43%、75.86% 和77.78%。3 个试验组免疫后150 d 猪的群体保护率均达到农业部规定≥ 70% 的标准。由表2 知，接种猪口蹄疫O 型灭活疫苗2 mL 后，15 ～ 150 d 免疫猪群体的群体保护率﹥ 70%，所以生产中遵照疫苗使用说明书规范操作，就可获得较好的免疫效果。

3 结论与讨论

1） 接种猪口蹄疫O 型灭活疫苗72 h 内，试验猪出现免疫副反应的头数是：A 组6 头，B 组22 头，分别为免疫数的20.00% 和73.33%（6/30、22/30）。由此可知，生产实践中不应随意加大免疫剂量，避免对动物机体造成伤害。免疫后150 d，3 个试验组群体保护率分别为71.42%、75.86%和77.77% ；到180 d 时，C 组（ 合成肽组） 的群体保护率为22.22%，A、B 2 组因试验猪销售未能检测，根据120 ～ 150 d A、B 2 组抗体OD 值下降的幅度可以看出，180 d 时这2 组猪的群体保护率都将低于70%。由此可知，接种猪口蹄疫O 型灭活疫苗和猪口蹄疫O 型合成肽疫苗后的群体有效保护期（免疫期）为150 d 左右（图3）。

2) 对猪口蹄疫O 型合成肽疫苗免疫抗体消长变化的研究表明，猪口蹄疫O 型合成肽疫苗免疫一次，即可确保高效价抗体维持至150 d。猪口蹄疫O 型合成肽疫苗具备免疫原性高，生物安全性好，免疫副反应小等优点，在生产实践中值得普及推广。由于有1 头猪接种猪口蹄疫O 型灭活疫苗后（B 组，4 mL），7 ～ 150 d 的检测结果均为阴性，表明该头猪未产生免疫抗体，其原因是否为加倍剂量免疫导致免疫不应答（免疫耐受）有待进一步探讨。

3) 在本试验中,B 组即加倍剂量注射猪口蹄疫O 型灭活疫苗后，猪群提前7 d 达到群体保护水平，但免疫副反应也随之大幅度增加( 为免疫数的73.33%)，主要表现为体温升高、精神沉郁呕吐和腹泻，因此只有在紧急免疫情况下，才建议使用该种免疫方法进行免疫。C 组即接种口蹄疫O 型合成肽疫苗后，未见猪群出现以上副反应；通过表2、图2 和图3 可知，接种口蹄疫O 型合成肽疫苗后猪群的群体保护率均较好，且抗体水平和群体保护率的时间较稳定，说明接种该疫苗效果最好。

本文选自《猪业科学》2015年第10期 “猪群保健”栏目中P92-93