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如何延长精液的保存时间?

如何延长精液的保存时间?

目前,随着猪人工授精技术的广泛推广,优良品种的种公猪精液在各大育种场之间
猪人工授精的新技术

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本文主要介绍了在商业化生产中常规的输精方法,猪人工授精的效果与精液质量、
开展猪人工授精需要哪些设施设备与用品

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公猪饲养要点(五) 公猪的生殖生理知识(3)

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  • 日期:2011-05-05 10:56
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  (二)精液的处理和检查 采集精液后应及时送到实验室对精液进行处理和质量评定,以 确定精子是否可用于授精。

  1.精液的处理 公猪的精液中含有25%~50%的胶状物,因此,应及时用多层纱 布或纱 网尽快将其过滤掉,否则这些胶体会吸附液体和精子, 使精液的体积很快 减少,当然也会使精子数目减少。即便采精时仅采取射精时中间富含精子的部分,也是如此。

  精液的外观评定十分重要,主要包括味、色、量等。判定精液是否有异味,如混有大量尿液 则会有尿味,有异味的精液不能用于输精,应及时淘汰。 公猪精液正常 的颜色应是灰白色或是 乳白色,如果精液中出现脏物、毛、血或尿等, 则说明精 液已被污染,这样的精液不能用于输精。有血往往是在采精时伤及公猪的生殖器官而引起的,而出现尿液则说明采精时温度不适当,只有都符合正常要求的精液才能 进行进一步的检查和处理,并测量精液的体积。

  2.精液品质的检查(1)显微镜检查 其内容主要包括精子活率、精子密度的测定及精子形态学检查。

  精子活率的测定:将一滴原精液滴在一张加热的显微镜载玻片上,显微镜工作台的温度应保持在37℃。由于精子的活率在不同温度条件下有很大的变异,为了得到可 比较的结果,要求检查活率时应保持恒温条件下进行。在进行检查时不要让阳光直接照射在精液样品上,远离易挥发的化学物质或消毒剂,这些物质都会对精子产生 毒害作用。精子的活率是指原精液在37℃条件下呈直线运动的精子占全部精子总数 的百分率。好的精液应在90%以上,应该注意,在判定活率时应采用原精液,因为稀释后的精液会因使用不同的稀释液或稀释倍数对精子的活率产生不同的影响,使 精液活率之间的判定出现差异。

  图5-7 公猪爬跨假台猪图5-8 精子形态结构精子密度的测定:最常用的方法是采用白血球计数器。在计数器上先根据均匀分布的原理,计数五个大格,每个大格又计数5个小格的精子数目。 对于压线的精子采 用的方法是计左不计右,计上不计下的原则。统计每格中所分布的精子数目,然后根据计算公式计算出精液中精子的数目。现在已经有了自动化很高的专门仪器,将 分光光度计、电脑处理机、数字显示或打印机匹配,只要将一滴精液加入分光光度 计,就可以很快得到所需的精子密度及总精子数。从镜检观看精子密度很高的精液往往呈现云雾状。

  精子的形态学检查:是采用稀释样品进行的。主要是观察精子的形态(图5-8 )是 否正常以及精子头部、尾部的损伤及头尾相离的情况,如果这样的精子数量较多, 那么精液将不能用于授精。

  死活精子比率也可以通过染色的方法进行检查,膜受损伤的精子一般吸附染料。这种比例的计算又直接影响着精液的稀释潜力。过去常用的染色方法是吉姆萨染色方 法,但这种方法比较费时。现介绍一种家畜精子细胞结构快速染色的方法。

  把公猪的原精液用0.9%生理盐水稀释成每毫升1~2×10(6)个精子的悬浊液。取 1滴稀释精液置于洁净、干燥的显微镜载玻片上,用另一玻片制成薄涂片, 涂片置 于48~50℃电炉上干燥1~2min,向涂片上滴加乙醚-乙醇溶液(1:1)室温(25℃)下放置3分种,滴加染色液并在48~50℃电炉上放置15~20min.染液成分:5 %苯 胺蓝溶液用0.1%的石碳酸配制2.5%的曙红Y溶液(pH6.5), 用流水冲洗染色涂片并在电炉上烘干;把干燥涂片放在丁香油中分化1~2min, 加二甲苯溶液除去丁 香油,用DPX(一种树脂胶)把盖玻片粘合在涂片上,置于1000 倍显微镜下观察。公猪精子细胞不同结构将呈现不同染色,精子头部为红中带蓝色,精子顶体鲜绿色, 顶体后部区为深紫色,赤道部分为浅红色,精干颈部无色,尾部绿色,尾部中段深 绿色,未段浅绿色,细胞质呈点状暗绿色。

  精子的存活时间 精子的存活时间也是精液品质评定过程中常用的方法。具体方法:将精液保存在一个固定的温度37℃或其它温度下,每隔2个h进行一次观察,并记录 该时间的精子活率,直至精子全部死亡为止。精子存活时间越长,活率下降越慢则表明精液品质越好。此外还有一些生理生化指标的测定,主要是用于科学研究,这 里不作介绍。

  (三)精液的稀释 精液稀释的目的是要使一头公猪的繁殖力比自然交配扩大很多倍,而且受胎率并不下降。例如:一头公猪一次射精所获得精子数目比受精要求的 数目多得多,大约多15~30倍。稀释后的输精量一般为50~100m1,其中含活精子 数为2000×106个。稀释液的要求是应该对精子的活率、 受精力以及单个精子的总 存活能力没有影响。

  精液稀释倍数的确定精液量(ml)×精子密度(×106/ml)×精子活率(%)×(1-异常精子%)

  稀释倍数= ─────────────────────────────2000×10(6)个单次输精所需的最少有效精子数精液稀释后的总体积(ml)=单次输精量(ml)×稀释倍数。

  注:单次输精量为50~100m1.稀释液的成分:一般精液稀释液包括有一种或多种保护剂,尽管目前采用的公猪精液稀释液有多种多样,但就其化学组成上来看主要有以下一些成分:1.一种代谢或营养物质,以减少精子自身能量消耗,以便延长精子寿命,一 般为糖类,如葡萄糖。

  2.适宜的缓冲体系,以保持精液的pH值及渗透压的基本稳定。

  3.大分子物质,以保护精子免受降温的不利影响,如牛血清白蛋白。

  4.抗生物素,以阻止细菌的生长。

  下面介绍在生产中常用的一些公猪常温精液保存的稀释液配方。

  Kiev液为最常用的稀释液,成分比较简单,可保存1~3天,授精后母猪产仔率为80.5%,每窝产仔平均9.3头,而Zor1esco液可常温保存猪精液7~8天,输精后,受胎率可达66.7%,窝产仔平均为8.2头,而8~9天输精受胎率为51.2%, 窝产仔平均 为7.8头。最近出现了一个Androhep液可以用于猪精液的常温保存。其配方如下, 单位:g/1000m1,葡萄糖26.0,柠檬酸钠8.0,碳酸氢钠1.2,EDTA2.4,HEPES9.0, 牛血清白蛋白(Serva ll930)2.5,稀释液的pH值为6.8,渗透压为309毫渗摩尔。

  表5-1 用于公猪槽洁常温保存的稀释液配方样(四)性行为、交配 公猪发育到初情期时,在生殖激素的作用下,通过神经(嗅、视、触、听)接受刺激,而对母猪发生性反射,并以一定的性行为表现出来。

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