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尿素溶液、饱和食盐水诊断哺乳仔猪球虫病效果比较

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  • 日期:2013-03-25 10:42
  • 来源:广东养猪业
尿素溶液、饱和食盐水诊断哺乳仔猪球虫病效果比较
吴家斌,金丽珠,刘立恒
(江西农业大学动物科技学院,江西 南昌 330045;)
 
  猪球虫病主要多发生7~11日龄的乳猪,是哺乳仔猪腹泻的重要病原。对哺乳仔猪危害极大,早期诊断和防治,是有效控制猪球虫病,保障养猪业健康发展亟需解决的问题。球虫病的诊断是通过猪粪便球虫卵囊的检测,一般采用直接涂片法、饱和盐水或饱和糖水漂浮法和离心法,常用的是饱和食盐水漂浮法。由于哺乳仔猪的营养完全依赖于母乳,其粪便成分含有未吸收完全的蛋白质、脂肪等物质,给哺乳仔猪球虫卵囊的检测带来一定的困难。为此,笔者依据尿素溶液使蛋白质变性和饱和食盐水与蛋白质产生盐析现象,用尿素溶液(48.57% , 比重1.13。)和饱和食盐水(27. 45%, 比重1.18)作为漂浮液,对江西高安某3个猪场(Z1、Z2、Z3、)哺乳仔猪球虫病进行诊断,比较其效果。
  1.材料与方法
  1.1 粪便来源  7~20日龄哺乳仔猪新鲜粪便60份,由江西高安某3个猪场(Z1、Z2、Z3、)各提供20份(份/窝)。
  1.2 药品   尿素CO(NH2)2九江石油化工厂生产;食盐NaCl江西盐业有限公司生产。
  1.3漂浮液的配制  饱和食盐水(溶液27. 45%, 比重1.18)、尿素溶液(溶液48.57% , 比重1.13。),分别按每1000 mL清水中相应加380、944.4g、加热溶解、冷却、过滤即可。
  1.4卵囊的检测  栏内多点采集哺乳仔猪新鲜粪便3~5g/窝。将粪便2~3g放于250 mL烧杯中,滴加少许清水搅拌成糊状, 续加清水100 mL搅拌、260目绢筛过滤,分装于两只50 mL的离心管中,2000r/min离心5 min倾上清液留沉淀物,分别加入饱和食盐水和尿素溶液各40 mL,拌匀后分别移入2只标记的35 mL白小口瓶中,瓶口液体成凸面。静置20 min,用载玻片触及凸面迅速翻转,在16×10倍显微镜下寻找卵囊。
  1.5感染标准的设定  显微镜下没有球虫卵囊的为阴性“-”;随意改变3个视野,当0<平均卵囊数≤1为阳性“+”;当1<平均卵囊数≤3为“2+”;当3<平均卵囊数≤8为“3+”;当8<平均卵囊数≤15为“4+”;当平均卵囊数>15个为“5+”。
  2.结果
  2.1漂浮卵囊现象  检测卵囊过程中,尿素溶液瓶内,随静置时间延长,杂质渐下降于瓶底,形成瓶口清亮瓶底浑浊;饱和食盐水瓶内,随静置时间延长,瓶内絮状物及气泡渐明显并上浮至瓶口,形成瓶口浑浊瓶底清亮(详见图1、图2)。
尿素溶液、饱和食盐水诊断哺乳仔猪球虫病效果比较  
  2.2显微镜下现象  含尿素溶液的较清亮,杂质和气泡较少,卵囊清晰且数量相对多; 含饱和食盐水的较浑浊,杂质和气泡较多,卵囊不清晰且数量相对少。(详见图3、图4、图5、图6)。
尿素溶液、饱和食盐水诊断哺乳仔猪球虫病效果比较


  2.3 Z1、Z2、Z3猪场哺乳仔猪球虫病的诊断情况   等分哺乳仔猪粪样,用饱和食盐水、尿素溶液两漂浮液对应检查60份粪样中的球虫卵囊。Z1、Z2、Z3猪场哺乳仔猪球虫病阳性率分别为60﹪(12/20)、55﹪(11/20)、45﹪(9/20)和80﹪(16/20)、70﹪(14/20)、65﹪(13/20),饱和食盐水比尿素溶液检测球虫病不仅阳性率低而且感染强度也低。尿素溶液诊断哺乳仔猪球虫病效果更好(详见表1)。
尿素溶液、饱和食盐水诊断哺乳仔猪球虫病效果比较

  4.分析与讨论
  4.1检测粪便中的球虫卵囊,粪便量及成分、漂浮液种类及浓度,是影响诊断球虫病的主要因素。哺乳仔猪处于哺乳、发病特殊期时,蛋白质、脂肪及细小颗粒多,容易遮掩卵囊,直接影响检测效果;当取较大粪便量漂浮检测时,所含卵囊固然增多,但杂质含量相应增多,影响检测效果;选择漂浮液及其浓度(比重大小)也直接影响检测效果。
  4.2等分哺乳仔猪粪样,用饱和食盐水、尿素溶液两漂浮液对应检查60份粪样中的球虫卵囊。结果表明:尿素溶液诊断哺乳仔猪球虫病优于饱和食盐水。其原因是哺乳仔猪粪便中存在的蛋白质较多,饱和尿素溶液使蛋白质变性,蛋白质构象改变而沉淀;饱和食盐水与蛋白质产生盐析现象,析出的蛋白质在饱和食盐水中带动其它细小颗粒渐浮。粪便中的油脂比重小,依靠离心倾上液而除去油脂。
  4.3 用直接涂片法检测哺乳仔猪球虫卵囊,其特点是检测快速 、准确性差;用饱和食盐水漂浮法检测哺乳仔猪球虫卵囊,其特点是视野杂质较多、检测结果相对准确但有一定误差;离心法(Teienan)检测时,其特点是视野很清晰,检测结果准确但检测方法复杂、成本太高、不适宜基层兽医工作者;尿素溶液漂浮法检测哺乳仔猪球虫卵囊,视野清晰,检测结果准确,成本低且尿素溶液经过处理后可作为肥料再利用,是哺乳仔猪球虫病诊断的好方法,建议推广使用。
 
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