口蹄疫与猪水疱病的鉴别诊断(2)

　　6.1.5羊多为散发，口腔粘膜上发现水疱烂斑和弥漫性炎症病变，山羊比绵羊更为明显。主要症状在蹄部，50%以上为蹄型口蹄疫。

　　6.2水疱病猪体以蹄部和鼻镜上的水疱皮与水疱液内含毒量最多。

　　6.2.1发病初期，血液、肌肉、内脏可带毒。

　　6.2.2患病猪的淋巴结、骨髓、脊髓、粪、尿也可能带毒。

　　6.2.3乳鼠、金田鼠因接种水疱病毒材料而发病死亡后的肌肉、内脏均发现有大量病毒。

　　6.2.4发病率20～100%。病初蹄冠、趾间、蹄踵的皮肤发红、肿胀、疼痛，站立时频频举蹄、跛行。随后蹄踵出现大小不等的水疱，波及趾间、蹄冠。水疱皮内有淡黄、淡红稍混浊的液体。

　　6.2.5有的仅1～2蹄有水疱，少数病例发现4蹄均有水疱，鼻镜、口腔发生水疱占4%。

　　6.2.6体温不高。严重病例局部化脓、坏死，蹄壳脱落，卧地不起，呈爬行状，但精神、食欲正常，与患口蹄疫的病猪有明显区别。

　　6.2.7发现个别病猪呈兴奋症状，以头触地作转圈运动。随后发生轻瘫、麻痹死亡的神经症状的病例。

7pH对病毒的影响

　　7.1采用组织培养口蹄疫病毒，以不同的pH溶液纯组织培养液处理，得出灭活90%病毒所需要的时间：pH为7或7.5时病毒最稳定，其感染力在持续5周的观察中略微减低；pH为8和9时病毒灭活的速度分别为3周，每周减低90%；pH为6.5和10的样品，其感染力为14 小时，减低90%；pH为6的样品，其感染力每分钟减低90%，然而约有百万分之一的病毒颗粒至少60分钟之内对灭活具有抵抗力；pH为 5的样品，其感染力每秒钟减低90%，约百万分之一的病毒颗粒在30分钟之内对灭活具有抵抗力；pH为2、3、4的三种酸化溶液中的病毒灭活太快，无法测定。在病猪体内(肌肉、内脏、淋巴结、骨髓等)的病毒由于受到组织细胞、组织液、蛋白质等保护因素的影响，用上述的pH值和时间的处理显然不能达到灭活90%病毒的目的。

　　7.2水疱病毒既抗酸又抗碱。pH2.0～2.5时均不被灭活；pH2.0以下的酸性溶液或pH12.5的碱情溶液才能杀死病毒。

8温度对病毒的影响

　　8.1据试验，使用纯组织培养物，在不同的温度处理后得出灭活90%的病毒所需的时间：61℃为0.5分钟；55℃为2分钟；49℃为1小时；43℃为7小时；37℃为21小时；20℃为11日；4℃为8周。由于受到组织、细胞、组织液、蛋白质等保护因素的影响，按上述温度和时间处理，同样也不能达到灭活90%病毒的目的。如在牛奶中的病毒当加温到85℃、80℃、75℃、70℃时才会分别于1、3、15、30、分钟内使其失去感染力。而在水疱皮内的病毒，即使在腐败状况下亦能存活较长时间。在粪池中也可保持39日，污水中可以保持感染力103日之久。牛舌上破裂的水疱皮内的病毒经过61℃～63℃的巴氏消毒30分钟后，仍然残存具有感染力的病毒。

　　8.2水疱病病毒对高温的抵抗力比较强。存在于死亡乳鼠体内的水包病毒，将其稀释10倍的浸出液，需加温至72℃1小时，才能全部杀灭。加温至70℃时保持尚有百万分之一的活毒残存。50℃经30分钟仍有感染力。56℃30分钟与80℃1分钟可杀灭。

　　蹄部经65℃～67℃、3～5分钟烫毛后，水疱皮仍有感染性。1℃～2℃保存10日，病毒滴度未见降低。在猪粪、猪舍中可存留2个月。4℃的脏泥浆水中70日不会死亡。18℃～20℃保存病毒存活二年以上。

9消毒剂对病毒的作用

　　9.1据试验，2%～3%氢氧化纳液、1%至2%的高锰酸钾溶液、1%的甲醛溶液、0.5%的过氧乙酸溶液等消毒剂对口蹄疫病毒都有良好的消毒杀灭作用。

　　9.2水疱病毒对消毒剂抵抗力较强。10%生石灰乳、2%来苏儿、5%漂白粉、20%草木灰水、03%次氯酸钠液在0℃左右24小时尚不能使水疱皮中的病毒灭活。5%甲醛溶液在室温中1.5%小时能使病毒灭活。10%甲醛溶液在室温中1小时能使病毒完全灭活。含有0.5%有效氯的漂白粉溶液，在10℃至25℃环境下，经30分钟，能杀死病毒。存在死经亡乳鼠体内的水疱病毒将其稀释10倍、100倍、1000倍的浸出液，分别用1%、0.5%和0.2%的过氧乙酸消毒15分钟，即可杀灭。

10实验室诊断的主要方法

　　10.1口蹄疫的实验室诊断以乳鼠保护试验与豚鼠接种试验液为简易可行。1～9日龄乳鼠接种试验为阳性。也可采用补体结合反应试验与琼脂扩散沉淀试验。还可采用交叉免疫法和补体结合反应结合起来，用于病毒亚型的鉴定。

　　10.2传染性水疱病的实验室诊断、乳鼠血清保护试验是常用而有效的方法。1～9日龄的乳鼠接种试验为阴性。也可采用血清中和试验予以诊断。还有反向间接血凝实验法诊断、补体结合试验和免疫荧光试验、放射免疫琼脂双扩散对流电脉病毒中和试验诊断法。