猪人工授精技术操作规程

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日期：2008-01-17 20:05
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　　前言

　　猪人工授精技术是养猪生产中经济有效的技术措施之一，其最大的优点是减少猪群中所需公猪的总数，增加优良公猪的利用机会。由于猪的人工授精工作不仅需要高水平的管理，而且技术要求高，从采精、检验、稀释、分装、保存、运输及输精是一环扣一扣，无论那一环节出了问题，都会影响到最后的受胎效果。因此，在总结过去猪人工授精技术工作的基础上，制定一个统一的操作规程具有重大意义。

　　本标准附录A、附录B、附录C都是标准的附录。

　　本标准由广西壮族自治区畜牧局提出。

　　本标准由广西壮族自治区畜禽品种改良站负责起草。

　　标准主要起草人：许典新、罗军、吴石坚。

　　本标准适用于广西境内各级猪场、猪人工授精站和养猪专业户。适用的公猪为长白、汉普夏、杜洛克、约克夏、巴克夏和广西地方猪品种等。其它品种猪参照执行。

　　1、公猪

　　1．1 经种猪测定站或县以上畜牧行政主管部门审定及检疫符合种公猪标准，发给合格证的公猪，方可作为种公猪使用。

　　1．2 滤精量100毫升(下限)。

　　1．3 精子活率70％(下限)。

　　1．4 精子密度中等以上。

　　1．5 公猪使用年限10月龄(下限)至4 岁(上限)。

　　2、采精准备

　　2．1 采精台的制作

　　用一个直径为20厘米，长120厘米的园木，两端削成弧形，安装四条腿，在木头上面铺一层稻草或旧棉胎等有弹性的软物，外面包一层软胶皮或猪皮(亦可用铁支焊接为半园，四条腿能活动的采精台)。组装后采精台后高60厘米，前高50厘米。

　　2．2 采精器具的消毒

　　2．2．1 胶质器具经洗涤剂洗净凉干后，隔水煮沸30分钟(下限)。玻璃搪瓷、金属等器具经洗涤剂净凉干后和160—200℃干燥箱消毒30--60分钟。

　　2．2．2 集精在采精前用5％葡萄糖溶液或稀释液冲洗一次，然后在集精杯上覆盖四层纱布。

　　2．2．3 采精操作者、种公猪、采精台以及一切与精液直接接触的器材都应严格进行常规消毒处理。器材温度均应保持在30℃左右。
　　3、采精

　　3．1 采精应在室内进行。采精室应清洁无尘，安静无干扰，地面平坦不滑。

　　3．2 采精员穿戴洁净工作衣帽，长胶鞋，胶手套。胶手套应先用75％酒精消毒、凉干，30分钟后使用。

　　3．3 采精前，将公猪赶进采精预备室后，应在40℃温水洗净包皮及其周围，再用0．1％高锰酸钾溶液擦洗、抹干。

　　3．4 采精方法，主要用手采法。

　　采精时，采精员站于采精台的右(左)后侧，当公猪爬上采精台后，采精员随即蹲下，待公猪阴茎伸出时，用手握紧其阴茎龟头，特别是要抓住螺旋部分，压力不宜太大，以控制其龟头不能转动或回缩为限，并带有松紧节奏，以刺激射精。当公猪充分兴奋，龟头频频弹弹动时，表示将要射精。公猪开始射精时多为精清，不宜收集，待射出较浓稠的乳白色精液时，应立即以右(左)手持集精杯，放在稍离开阴茎龟头处将射出的精液收集于集精杯内。当射完第一次精后，刺激公猪射第二次，继续接收。射完精后，待公猪退下采精台时，采精员应顺势用左(右)手将阴茎送人包皮中。不得粗暴推下或抽打公猪。

　　4、精液检查

　　4．1 精液量、色泽、气味、PH值

　　公猪的射精量，一般为100—300毫升，正常精液的色泽为乳白色或灰白色，略有腥味，精液PH值为6．8—7.2。

　　4．2 精子浓度

　　4．2．1 精子浓度是指每毫升精液中含有精子数的多少。

　　4．2．2 测定方法：

　　检查精子浓度用血球计数器计算。其方法是用白血球吸管吸取精液至刻度0．5处，再吸取3％氯化钠溶液至刻度101处，捏住吸管的两端充分振荡后，将吸管前部的滤体吹弃2—3滴，然后滴一小滴于计算玻板上盖玻片边缘，使其自行渗入计算室内，待液体稳定后，在400~600倍的显微镜下计数。观察计数时应数五个有代表性的中方格(计80个小方格)内的精子数，对头部压在方格四边线上的精子，只能计算两条边上的。每次要做2—3 遍，求其平均值。最后将精子总数乘以 10000，就得每立方毫米精液中所含精子数，再将此数乘以1000，便得每毫升精液的精子数。

　　4．3 精子活力

　　4．3．1 精子活力是以直线前进运动的精子占总精子数的比率来确定的。一般采取“十级制评分法”进行评定。

　　4．3．2 精子活力测定方法：将精液滴在载玻片上，再盖上盖玻片，然后在35℃左右显微镜下放大150—200倍，仔细观察精子活动情况。

　　4．3．3 精子活力等级评定

　　1．0级指有100％精子呈直线式前进运动。

　　0．9级指有90％精子呈直线式前进运动。

　　0．8级指有80％精子呈直线式前进运动。

　　0．7级指有70％精子呈直线式前进运动。

　　0．6级指有60％精子呈直线式前进运动。

　　0．5级指有50％精子呈直线式前进运动。

　　4．3．4 只有60％12下精子呈直线前进运动的精液，不能用于输精。合格的精子活力不能低于0．7级。

　　4．4 精子畸形率的检查

　　4．4．1 检查方法：将精液做成抹片，自然凉干，入95％酒精，3分钟后，取出用清水冲洗阴干，然后用美兰或兰墨水染色3分钟，用清水冲洗阴干，在400—600倍的显微镜下检查。一般每次要数200个以上的精子。

　　4．4．2 精子畸形率计算公式为：

　　4．4．3 精子畸形率不能高于15％。高于15％的不能使用。

　　5、精液稀释

　　5．1 稀释液用溶质应为试剂级(下限)。

　　5．2 稀释液的配制

　　5．2．1 葡萄糖稀释液葡萄糖5克，蒸馏水100毫升。

　　5．2．2 糖一柠一卵稀释液。

　　葡萄糖5克，柠檬酸钠0．5克，蒸馏水 100毫升，卵黄5毫升。

　　5．2．3奶粉稀释液脱脂奶粉9克，蒸馏水100毫升。

　　5．2．4 “卡铺”稀释液

　　葡萄糖6克，柠檬酸钠0．35克，碳酸氢钠0．12克，乙二胺四乙酸二钠0.37克，蒸馏水100毫升。

　　上述各稀释液按配方先将糖类、奶粉及柠檬酸钠等溶于蒸馏水中，过滤后蒸气消毒30分钟，取出凉至30—35℃时，加入卵黄，然后，以每100毫升加入青霉素、链霉毒各5万单位，搅拌均匀备用。

　　5．3 精液稀释

　　稀释精液时，稀释液温度应与精液温度相等。温度应在20℃(下限)一28℃(上限)。精液稀释应在无菌室内进行，将稀释液缓慢倒入精液中慢慢摇匀。稀释后，每毫升精液应含有效精子0．5亿(下限)。

　　6、精液的分装、贮存、运输

　　6．1 分装

　　精液稀释后，取样检查活力，合格者才能分装。分装时，用量筒按剂量量取精液倒人容器，一般每头份20毫升。分装完后，即将容器密封，贴上标签。

　　6．2 贮存

　　精液分装后，避光贮存，在温度10℃－ 15℃条件下贮存。

　　6．3 运输

　　用毛巾、棉花等包裹贮精容器，装入 10℃－15℃冰壶或泡沫箱等恒温器中运输，防止受热、震动和碰撞。

　　7、输精

　　7．1 发情鉴定

　　7．1．1 发情初期

　　母猪精神不安，食欲减少或不吃，叫鸣，外阴部微充血肿胀，四处游走、张望、喜爬其他猪，但不接受其他猪爬跨，特别在清晨表现更明显。持续时间12—48小时。多数为24小时。

　　7．1．2 发情中期

　　母猪精神兴奋接受其他猪爬跨，食欲减少或停止。外阴部充血肿胀明显，阴道粘液光润透明。持续时间6—36小时。

　　7．1．3 发情后期

　　母猪发情迟滞、喜卧，外阴部肿胀稍退，阴道粘膜充血稍减，由深红色变浅红色，阴道粘液变粘稠。持续时间12—24小时。

　　7. 1．4 休情期

　　母猪精神状态安定，食欲恢复正常。

　　7. 2 输精时机

　　母猪辅精时机以发情后期为好，当按压母猪腰尻部，母猪表现很安定，两耳竖立或出现“静立反应”，此时是输精最佳时机。如用公猪试情，一般在母猪愿意接受公猪爬跨后的4— 8小时之内输精为宜。

　　7．3 输精准备

　　7．3．1 输精场所应保持安静清洁，输精器械必须严格消毒。

　　7．3．2 一次输精数量应按母猪的体重和精液质量来确定。每头每次输精量为20—40 毫升，有效精子数10—20亿。

　　7．3．3 用0．1％高锰酸钾溶液将母猪的外阴户消毒，再用棉花洗净。

　　7．3．4 输精方法

　　输精方法有注射法和自然法两种。输精时，用玻璃注射器吸取精液，再将它连接胶管(自然法直接将精液容器连接胶管)，然后把输精胶管从母猪阴户徐徐插进去，插到不能再插为止，动作要轻，输精员用左(右)脚踏在母猪腰背部，左手拉住尾巴，右手持注射器，按压注射器柄，精液便流人子宫。注射时，最好将输精管左右轻微旋转，用右手食指按摸阴核，增加母猪快感，刺激阴道和子宫的收缩，避免精液外流。输完精后，把输精管向前或左右轻轻转动2分钟，然后轻轻拉出输精管。

　　7．4 输精次数

　　一个发情期输精二次，第一次输精后隔 8—12小时，再进行第二次输精。

　　8、猪人工授精站要求

　　应符合附录A(标准的附录)的要求。

　　9、猪人工授精各项指标计算方法

　　应按附录B(标准的附录)规定计算。

　　10、猪人工授精记录表

　　应按附录C(本标准的附录)规定执行。

　　附录A

　　猪人工授精站的要求

　　A、1建站要求

　　建站要在配种范围的中心，交通方便，易于防疫的地方。

　　A、2授精站设备

　　采(输)精室一处，精液处理室一处，采精架一个，操作台一张。猪舍若干间。

　　A、3器材药品

　　表A1中规定了猪人工授精站所需的器械与药品。

　　表A1 所需的器械与药品

品名	单位	数量	品名	单位	数量
温度计	支	5	试管刷	把	5
输精管	支	10	来苏	m1	适量
酒精灯	个	2	酒精	ml	适量
显微镜	台	l	高锰酸钾	500	2
架盘天平	台	1	氯化钠	500	9
消毒柜	个	1	柠檬酸钠	500	2
集精瓶	个	10	葡萄糖	500	2
量筒量杯	个	5	奶粉	500	适量
蒸馏器	个	1	碳酸氢钠	500	2
载片、盖片	片	100	乙二胺四乙酸二钠	500	2
广口保温瓶	个	2	青霉毒		适量
洗脸盆	个	5	链霉素		适量
电冰箱	个	l	恒温箱	个	1
注射器	支	6	白血球吸管	支	2
血球计数板	块	2