实验室中精液稀释几个细节处理

 1、温度

    1.1采精前的准备

    在精液采集前所有与精液接触的物品包括采精杯、精液分装瓶（如果有条件）等全部要在恒温箱37 ℃预热（适季节变化，预热温度也将有变化），保证在采精的时候精液与其接触物品温度相差不高于0.5 ℃。精液稀释也要提前预热，放在37 ℃水浴锅中，保证稀释液混合均匀。实验室空调设置为25 ℃最为适宜。

    1.2精液的稀释

    稀释液和原精的温差不得高于0.5 ℃，否则将严重影响精液稀释后的精子活力。

    1.3精液的分装、保存与运输

    精液稀释后要立即进行分装，从恒温箱中取出精液分装瓶，使稀释后精液和精液分装瓶的温差不高于0.5 ℃。精液分装后不宜将精液立即放入17℃保温箱中保存，让精液在室温25 ℃缓慢降温后，再将其放入保温箱。精液运输过程中同时要应用恒温箱，以保证精子的活力不受到任何影响。

2、精液称重

    将电子天平清零，然后把预热好的保温杯称重，再交由生产人员采精。把装有精液的保温杯再次称重。

    精液重量=采精后的保温杯重-预热后的杯重

    精液体积=精液重量

    保温杯中精液重量的准确性

    实验室负责预热保温杯以及精液称量稀释。在每次保温杯预热和精液称重的过程中，都会有6至40 g的误差。

    造成误差的原因：在采精前，保温杯需要预热，方法使用37 ℃温水盛满保温杯，然后倒掉，放入集精袋和滤纸。在这个过程中，保温杯的内外壁都沾有水，外壁可以擦去，而为了不影响保温杯内温度，内壁一般不擦。这就影响了保温杯整体重量。

    如果里面有过多的水没有倒掉，就会有大的误差，即使杯中无水分倒出，也会有10 g的误差。误差量的存在，可能影响生产中对个别猪的使役，以及对猪的饲喂管理。解决方法：1应该在每次采集精液称重后适当减去水引起的误差部分。

2实验室人员在做保温杯时尽量将水倒干，避免误差过大。

3、精液各项直观指标测定

    3.1容量：新鲜精液容量应在100~ 250 mL ；过多可能混有尿液或副性腺有炎症，过少说明采精方法不当或公猪生精能力降低。 

    3.2色泽：精液色泽应为乳白色到灰白色，红色说明有血液，绿色说明有脓液，清黄色说明混有尿液，色泽不正常的精液必须废弃。 

    3.3气味：精液应没有明显异味，有腥味说明有脓液，有臊味说明混有尿液，有异味的精液必须废弃；

    3.4密度测定：估测，可通过精液的外观检查如色泽估测精子密度，呈乳白色说明精子密度大，白度越高说明浓度越高，相反则说明精子密度低。

4、精液的稀释

    经过品质检查合格的精液应立即进行稀释，将稀释液缓慢倒入精液中，并轻轻搅动或摇动。稀释时，最好精液仍放在原来的袋中。一般可根据需要和计算（估算）的稀释倍数、精液量，在精液中加入适量的稀释液。最少稀释倍数为1:2.5，最大稀释倍数不超过1:9。

    如果是收集的是全份精液（不包括精清），可按1:3稀释，稀释后每个剂量应为80 mL，每个剂量含20 mL鲜精，这样可保证每个剂量中有30～60亿个精子。同样，如果是浓份精液，可按1:7稀释，每个剂量80 mL，每份含鲜精10 mL。

5、存放时间

    采精后应及时进行全份精液稀释，保证精子活力。有试验表明浓份精液2小时左右精子活力为0。

    精子应在将稀释后精液置室温（25℃左右）2小时，然后放入精液保存箱 （17 ℃）。