猪的人工授精实验室精液处理规范

     目标：保证精液在不受不良物理、化学、生物因素影响的情况下，进行精液的处理和保存。      用品清单：采精用品、精液品质检查用品、精液稀释液配制与精液稀释分装用品、输精用品、消毒用品（详细用品见用品清单）

1．    采精室送来的精液应在最短的时间内进行稀释和保存，但在稀释前应对精液进行一些检查，以确定精液是否有使用价值。 2．    直观指标测定       容量：新鲜精液容量应在100-250ml ；过多可能混有尿液或副性腺有炎症，过少说明采精方法不当或公猪生精能力降低。      色泽：精液色泽应为乳白色到灰白色，红色说明有血液，绿色说明有脓液，清黄色说明混有尿液，色泽不正常的精液必须废弃。      气味：精液应没有明显异味，有腥味说明有脓液，有臊味说明混有尿液，有异味的精液必须废弃； 3．    活力测定      将精液轻轻摇动或用洁净的玻璃棒搅动，用微量移液器或玻璃棒取精液10ul，放于预温后载玻片中央，盖上盖玻片，在载物台上预温片刻，用推进器将载玻片推至物镜下，在100和400倍下进行观察。如果精子无凝集、出现大群运动波，无明显死亡精子应为“很好”（5分）；如果精液出现大群运动波，但有少量死亡精子应为“好”（4分）；如果有成群运动，但有精子少量凝集现象，应为“一般”（3分）；有大片凝集或死亡，但有部分精子在正常运动应为“差”（2分）。一般新鲜精液和保存精液应在3分以上方可用于稀释和输精。没有载物台恒温设备的实验室，可将预温至37℃的厚玻璃板和载玻片叠在一起，取10ul精液放于载玻片上，盖上盖玻片，迅速放在100倍镜头检查活力。      在进行精子活力或密度测定时，应注意（1）显微镜的光源光圈应尽量小些，光线过强，就无法看清精子；（2）每次调节显微镜焦距时，都应先将载物台先调到与物镜最近的距离，但不能使盖玻片与物镜接触，从目镜观察，缓慢放低载物台，直到观察到精子为至；观察活力时应轻轻调节微调，以观察各个层次的精子活动情况。 4．    密度测定        小规模精液站一般不进行密度测定，可通过精液的外观检查如色泽估测精子密度，呈乳白色说明精子密度大，白度越高说明浓度越高，相反则说明精子密度低。如果有条件可用计数板计数测定密度，如果有专用的比色仪进行密度测定更方便。也可将精液样品送至科研单位，让技术人员进行密度测定，并将此数值作为稀释倍数的参考。正常的全份精液的密度在1.5-3亿/毫升。浓份精液密度在3-6亿/毫升。 5．    畸形率测定       初配公猪在使用前及正常使用的种公猪应每月进行一次畸形率测定，精子可用伊红、龙胆紫或纯兰、红墨水等染色剂染色，并在显微镜400倍下观察，畸形率不应高于25%。如果带中段原生质的精子增多，说明采精频率过高，如果断尾精子增多说明公猪受过高热或发烧过；其它畸形精多，可能公猪有先天性损征应予以淘汰。也可将精液样品送至科研单位进行评定。 6．    精液的稀释      经过品质检查合格的精液应立即进行稀释，稀释时应将精液与稀释液放在同一个水浴锅中2分钟等温后，将稀释液缓慢倒入精液中，并轻轻搅动或摇动。稀释时，最好精液仍放在原来的食品袋中。一般可根据需要和计算（估算）的稀释倍数、精液量，在精液中加入适量的稀释液。最少稀释倍数为1:2.5，最大稀释倍数不超过1:9。如果是收集的是全份精液（不包括最初射出的精液），可按1:3稀释，稀释后每个剂量应为80毫升，每个剂量含20毫升鲜精，这样可保证每个剂量中有30-60亿个精子。同样，如果是浓份精液（约为全份精液的一半），可按1:7稀释，每个剂量80毫升，每份含鲜精10毫升。 7．    精液的分装      将稀释后的精液放在台架上，分装管的玻璃管一端插入精液中，打开开关，用一支5ml一次性注射器套上移液管的吸咀与另一端连接，拉动注射器活塞，使精液充满分装管，关闭开关，取下注射器及吸咀，将分装管端插入精液袋的灌装口，并将精液袋挂在固定的板面上，使其自然悬垂。打开开关，使精液进入精液袋内，待精液灌装到规定刻度时，关闭开关，将管插入另一悬挂的精液袋内，然后打开开关。取下灌装好的精液袋，尽量减少袋内的空气量，放在热封口机上封口。封口后的精液可暂放在一个泡沫塑料盒中，等全部灌装完后，将精液袋在泡沫塑料盒中停留片刻，温度下降到25℃上下，再放入17℃恒温冰箱中保存。 8．    精液的保存      应确保冰箱功能正常和通电正常，每12或24小时将精液袋取出，上下翻转数次，使沉淀的精子与稀释液混合一下，有利于延长保存时间。如果停电时间不超过4小时，应在停电期间尽量减少开冰箱的次数。如果停电时间过长，冬季可在冰箱中放置30℃左右的水袋，夏季可在冰箱下层放置一些冰块，以维持合适的温度，这时应每隔2个小时检查以下冰箱内的温度。 9．    精液的运输

     袋装精液可放在泡沫塑料箱中运输。输精时，也应将精液放在泡沫塑料箱中运至待配母猪舍内。

来源：不详